Tổng quan

Tế bào ung thư lưu hành (CTC) bong ra từ khối u nguyên phát vào máu là trọng tâm của nghiên cứu sinh thiết lỏng. Máy tách tế bào ung thư lưu hành MagCapturer làm giàu các tế bào hiếm này từ mẫu máu. Bài viết này giải thích nguyên lý làm giàu và tại sao việc tách CTC có giá trị nhất khi kết hợp với các phương pháp phân tích hạ nguồn, tạo thành một mô-đun của quy trình làm việc rộng hơn. Hiểu được thiết kế theo mô-đun này giúp các phòng thí nghiệm lập kế hoạch năng lực và tránh đầu tư quá mức vào bất kỳ bước nào.

Nguyên lý làm giàu CTC

CTC cực kỳ hiếm - thường chỉ một vài tế bào trong hàng triệu tế bào máu - do đó phân tích trực tiếp là không khả thi. Các phương pháp làm giàu khai thác các dấu ấn bề mặt như EpCAM thường biểu hiện trên các tế bào ung thư biểu mô. Bắt giữ miễn dịch từ tính sử dụng các hạt từ tính được phủ kháng thể liên kết với các tế bào đích; sau đó, một trường từ tính sẽ tách chúng khỏi phần lớn các tế bào hồng cầu và bạch cầu, tập trung quần thể quan tâm để kiểm tra.

Kết hợp với xét nghiệm phân tử và tế bào học

Phần CTC được làm giàu trở thành đầu vào cho các kỹ thuật bổ sung. Lai tại chỗ huỳnh quang hoặc miễn dịch huỳnh quang có thể đặc trưng hóa từng tế bào, trong khi các quy trình bộ gen như giải trình tự thế hệ mới có thể thăm dò các thay đổi có thể hành động khi thu thập đủ vật liệu. Bằng cách kết hợp làm giàu với các xét nghiệm này, một lần lấy máu hỗ trợ nhiều tuyến điều tra thay vì một kết quả duy nhất, tăng lượng thông tin thu được từ một mẫu.

Quy trình làm việc và các cân nhắc về mẫu

Thành công thực tế phụ thuộc vào việc xử lý tiền phân tích nhất quán: xử lý kịp thời, chất chống đông máu phù hợp và trộn cẩn thận bảo vệ tính toàn vẹn của tế bào. Các phòng thí nghiệm nên xác nhận rằng bước làm giàu thu hồi các dấu ấn có liên quan đến nghiên cứu của họ và ghi lại kết quả thu hồi, vì các khối u khác nhau biểu hiện các protein bề mặt khác nhau. Coi tách CTC là một mô-đun trong quy trình làm việc rộng hơn - thay vì một kết quả độc lập - mang lại dữ liệu dễ diễn giải nhất cho các nhà nghiên cứu và bác sĩ lâm sàng. Đối với các phòng thí nghiệm xây dựng dịch vụ CTC, việc xác định trước kết quả có thể báo cáo - cho dù đó là số lượng, kiểu hình hay hồ sơ bộ gen - để các bước làm giàu và hạ nguồn được chỉ định phù hợp với mục tiêu đó. Đào tạo chéo nhân viên về cả thiết bị tách và nền tảng phân tích giúp tránh tắc nghẽn khi mẫu đến theo lô, và một quy trình vận hành tiêu chuẩn được ghi lại giúp kết quả có thể so sánh được giữa những người vận hành và ca làm việc. Khi lĩnh vực này trưởng thành, việc kết hợp làm giàu với các phương pháp trực giao cũng củng cố niềm tin vào các phát hiện sự kiện hiếm, làm cho quy trình làm việc trở nên hơn tổng các mô-đun riêng lẻ của nó.

Câu hỏi thường gặp

H: Tế bào ung thư lưu hành được bắt giữ như thế nào? A: Thông thường bằng cách liên kết miễn dịch từ tính với các dấu ấn bề mặt như EpCAM, sau đó tách từ tính khỏi các tế bào máu khác.

H: Những xét nghiệm nào theo sau quá trình làm giàu CTC? A: Nhuộm tế bào học, FISH, miễn dịch huỳnh quang hoặc giải trình tự bộ gen, tùy thuộc vào câu hỏi nghiên cứu hoặc lâm sàng.

H: Một lần lấy máu có đủ để phân tích CTC không? A: Mẫu tĩnh mạch là điểm khởi đầu, nhưng cần xử lý và làm giàu kịp thời trước khi có bất kỳ phân tích có ý nghĩa nào.